HPV的检测方法
HPV型别、含量是进行HPV检测的主要内容。目前主要通过分子生物学方法进行HPV- DNA的检测,包括核酸杂交方法和聚合酶链反应(PcR)的方法。
1、聚合酶链反应(PcR)法:特点是有较高的敏感性,可进行HPV分型。缺点是对实验室环境要求较高,容易发生样本间的交叉污染,从而导致假阳性率高。
2、核酸杂交法:特点是有较高的特异性和敏感度,也可进行HPV DNA的分型。分为:
(1)核酸印迹原位杂交法:适用于HPV分型和HPVDNA分子量鉴定,灵敏性高,但因操作复杂.需要新鲜组织标本,不便于临床大规模应用。
(2)斑点印迹法:其敏感度和特异性均低于核酸酸印迹原位杂交法,虽然经济实用,但实验过程存在放射性污染。
(3)原位杂交法:通过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高。(推荐阅读:宫颈癌有哪些症状表现)
(4)杂交捕获法:是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大。首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链,DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA DNA杂合体捕获,耦联有碱性磷酸酶的二抗与RNA-DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光,判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA—DNA杂合体的含量。目前此法已获FDA批准,可在临床使用.是种检测HPV DNA的非放射性技术。
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目前临床上广泛使用的第2代杂交捕获法,对高危型HPV检测的阴性预测值达99.7%,且有高度的重复性,实验室要求简单。结合细胞学HPV核酸检测可提高细胞学检测的阴性预测值,从而延长两次检测的间隔时间,降低经济费用。
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